容器密封性测试方法（CCIT）有很多种，既有物理方式检测，如亚甲基蓝染色，真空衰减，激光、氦泄漏等方法，也有微生物挑战试验。

传统的CCIT方法，如微生物挑战试验或蓝染色侵入试验，被描述为与概率结果相关的方法，这会导致发现中存在一些不确定性，并且难以定量验证关键泄漏检测方法。而其他基于分析测量的CCIT方法，如氦泄漏测试、基于激光的气体顶空分析或真空衰变，则被描述为产生客观、定量数据的方法，能够检测关键泄漏以及基于分析的验证。

目前应用西林瓶在线CCIT常见的是基于真空衰减测量方式的设备。真空衰变方法，是让西林瓶进入到密封检验“单元”内，西林瓶周围的空气在特定的预定义真空水平下排空。如果存在泄漏，瓶内内的空气/气体将流入检验“单元”，降低真空度，表明存在泄漏。市场上，此类设备根据测试单元的数量，在线速度可达到400瓶/分钟，甚至更高。但100%检查时的运行速度，可能会带来允许的缺陷尺寸增加到更高的水平。

虽然，在包材的早期开发阶段，供应商有义务确保其在设计上能够确保无菌。因此，必须测试包材是否存在0.2µm范围内的缺陷，分别为6*10-6 mbar*l/s（“最大允许泄漏水平”；MALL）。根据Kirsh的研究，这是微生物进入故障率为0%的缺陷尺寸。但是，完整性测试主要在2至30µm缺陷尺寸范围内进行。主要原因是可用方法的可行性，即在合理的测试时间内检测较小的缺陷。另外，也有些研究表明5µm左右的孔径对带来的无菌风险很低。

根据USP1207，无菌药物包装内的顶空 Head space 是产品的组成部分，因此需要符合相应的质量相关属性。对于氧敏感配方，残余氧浓度是其中一个属性，而对于冻干剂型，容器内的真空维持是另一个属性，一些冻干产品在压塞前，还采用氮气进行复压，来改善西林瓶内顶空的组分。这些值随时间的变化提供了可以导出其他质量相关属性的信息，例如完整性和稳定性。

由此可见，一个简单的顶空氧气测量也可是一个冻干产品CCI测试的原理基础，即检测确定是否氧气进入有CCI缺陷的西林瓶。这让微负压或充氮组分的冻干产品在线完整性检测多了一个选择，即激光/TDLAS形式的顶空分析检测设备。与真空衰减一样，也是无损检测，而且最高达600 瓶/分钟。

另外，在之前文章中也提及过，行业和监管越来越多关注轧盖之前的完整性，冻干剂型与纯液体灌装过程相比，密封过程的复杂性更高，如果西林瓶在冻干卸料阶段，即在冻干机与轧盖机之间转运或停留阶段发生泄漏，冻干西林瓶会失去了（部分）真空以及进入氧气，导致初始氮气顶空损失。相比真空衰减测量设备，激光检测无需提前轧盖锁紧胶塞，且设备体积更小，尺寸紧凑，占用空间小，也为在联动线中间放置提供了可能性。

欧盟无菌药品生产GMP附录1的修订主题之一就是无菌产品的容器密封完整性（CCI）检查，这也是大多数监管机构目标，而且迅速向所有无菌产品的强制性100%CCI迈进，尽管到目前为止，这更多适用于熔融封闭的容器（玻璃安瓿或塑料BFS），其他容器的样品只根据适当的程序（待定义和验证）进行完整性检查。但人们普遍认为，在未来几年内，100%完整性测试要求将逐步扩展到各种容器和所有法规或药典中。因此，冻干产品的100% CCI检验设备的应用也必将是未来生产线发展的趋势之一。

最后仍需强调，CCI测试可作为产品稳定性测试计划的一部分进行，但不能替代无菌测试。仅CCI测试不能证明产品无菌性。